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【簡答題】一個約有5000堿基對的小型雙鏈環(huán)狀病毒DNA,它含有由72bp直接串聯(lián)成的重復順序。這72bp片段中有一個EcoRI的切點,病毒的其他部位不含有這個切點。為了揭示該72bp重復順序的功能,現(xiàn)打算去除一個72bp片段,試描述構(gòu)建這樣一種修飾性病毒染色體的方法及其所需的酶。
答案:
設原片段為(AB)n,用EcoRI切割,從水解產(chǎn)物分離出重復序列(n-1)(BA)和兩個片段5′-A與B-3′,用3′-...
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【簡答題】入噬菌體DNA是線狀雙鏈DNA,具有重疊互補的末端(“粘性末端”)。DNA連接酶可以將λDNA連成閉合的環(huán)狀DNA。用細菌堿性磷酸酯酶或牛脾磷酸酯酶預處理線狀λ噬菌體DNA可以避免DNA連接酶對它的環(huán)化,試作出解釋。
答案:
連接酶要求被連接的底物DNA的5′端有磷酸基團。
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【簡答題】在某噬菌體實驗中觀察到感染E.coli B只產(chǎn)生很少的噬菌斑再感染E.coti B產(chǎn)生大量噬菌斑,解釋此現(xiàn)象。
答案:
存活下來的病毒獲得了修飾(甲基化)特性,逃脫了E.coli的限制性內(nèi)切酶作用。
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